合肥六中2021-2022学年第二学期高二年级期中考试生物试卷一、选择题1.用白萝卜制作泡菜的过程中，采用适当的方法可缩短腌制时间。下列方法中错误的是（　　）A.将白萝卜切成小块B.向容器中通入无菌空气C.添加已经腌制过的泡菜汁D.注意保持适宜的发酵温度【答案】B【解析】【分析】1、泡菜腌制过程中起作用的主要是假丝酵母和乳酸菌，在无氧条件下乳酸菌无氧呼吸产生乳酸。2、泡菜的制作流程是：选择和处理原料、洗净泡菜坛、调味装坛、密封发酵。【详解】A、将白萝卜切成小块可以扩大白萝卜与腌料的接触面积，缩短腌制时间，A正确；B、泡菜制作所需菌种为乳酸菌，制作过程中应保持无氧环境，向容器中通入无菌空气不利于腌制，B错误；C、泡菜汁中含有一定量的发酵菌种，所以在腌制过程中，加入一些已经腌制过的泡菜汁可缩短腌制时间，C正确；D、乳酸菌中的酶发挥作用需要适宜的温度，故保持适宜的发酵温度，有利于乳酸菌的无氧呼吸，可缩短腌制时间，D正确。故选B。2.发酵产品是中国传统食品中一个重要的类别，承载了中华民族悠久的历史和丰富的文化内涵。下列有关叙述正确的是（　　）A.泡菜制作过程中，需要警惕亚硝酸盐含量过高B.利用简易装置制作酸奶的发酵过程中，无需适时打开瓶盖放出气体C.检测果酒发酵前后发酵液的温度变化，可作为果酒制作是否成功的依据D.果醋制作中醋酸菌的碳源和能源，都只来自于果酒发酵产生的酒精【答案】B【解析】\n【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：(1)在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；(2)在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。2、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。3、果醋制作过程中的菌种是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，在氧气、糖源充足时，醋酸菌能将糖分解成醋酸，糖源不足时可以将乙醇转化成乙醛再转化成醋酸，最适宜醋酸菌生长繁殖的温度是30~35℃。【详解】A、随着泡菜腌制时间的延长，乳酸菌产生的乳酸增多，亚硝盐的含量会降低，不需要警惕亚硝酸盐含量过高，A错误；B、酸奶发酵的原理是乳酸菌进行无氧呼吸产生乳酸，因为乳酸菌无氧呼吸只能产生乳酸，不会产生气体，因此利用简易装置制作酸奶的保温发酵过程中，无需适时打开瓶盖放出气体，B正确；C、酵母菌细胞呼吸会释放能量，其中大部分能量以热能形式散失，这会导致发酵液的温度发生变化，但这不可作为果酒制作是否成功的依据，C错误；D、果醋制作中醋酸菌的碳源和能源，可以是来自于果酒发酵产生的酒精，也可以来自葡萄糖，D错误。故选B。3.下图为某同学设计的酿制苹果醋的基本流程图和发酵装置示意图。相关叙述错误的是（　　）A.①过程要先清洗再切块以减少杂菌的污染B.②过程加入果胶酶可以充分破坏细胞壁以提高出汁率C.③过程发酵所用的醋酸菌无具膜结构的细胞器D.④过程需要将图2发酵装置中的充气口开关打开【答案】C【解析】【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。2\n、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详解】A、过程①如果先切块，则内部组织容易被杂菌污染，故应先清洗后切块，A正确；B、细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，可以在过程②过滤之前用纤维素酶和果胶酶破坏细胞壁，提高苹果的出汁率，B正确；C、③过程发酵属于酒精发酵，需要的菌种为酵母菌，酵母菌属于真核细胞，存在具膜结构的细胞器，如内质网、线粒体等，C错误；D、④过程为醋酸发酵，所需要的菌种为醋酸菌，为需氧菌，故需要将发酵装置中的充气口开关打开，D正确。故选C。4.下列有关实验的操作中，错误的是（）①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③对于不耐高温的液体，如牛奶，用巴氏消毒法消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌A.①③B.②④C.⑤⑦D.④⑥【答案】D【解析】【分析】使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。【详解】①100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，①正确；②酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；③对牛奶这种不耐高温的液体可用巴氏消毒法消毒，③正确；④\n利用葡萄制作葡萄酒利用的是附着于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒时葡萄不进行灭菌，以免杀死酵母菌，④错误；⑤培养基通常用高压蒸汽灭菌的方法进行灭菌，⑤正确；⑥指示剂和染料混有微生物，故加入培养基前需灭菌，⑥错误；⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌，即用灼烧灭菌法进行灭菌，⑦正确。故选D。5.解磷菌是土壤中的一类功能微生物，包括细菌、真菌和放线菌。筛选出土壤中的高效解磷菌并制成生物菌剂，可以提高难溶性磷的利用率。下表为“分离出土壤中具有解磷功能的微生物实验”的培养基配方，下列说法正确的是（　　）物质葡萄糖(NH4)2SO4NaClKClCaCO3磷酸三钙琼脂质量/g100.530.352015A.培养基中加入琼脂的目的是作为凝固剂和提供碳源B.该培养基是以磷酸三钙为唯一磷源的选择培养基C.用平板划线法纯化解磷菌可以计数其活菌的数量D.可根据培养基中透明圈的大小确定菌株的解磷能力【答案】B【解析】【分析】1、微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种、划线，在恒温箱里培养，在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。2、选择培养基：根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率，如加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌。【详解】A、配制固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂，琼脂一般不会被微生物所利用，A错误；B、本实验的目的是获得具有解磷功能的微生物，故其选择培养基中应以磷酸三钙为唯一磷源，B正确；\nC、用稀释涂布平板法纯化解磷菌可以计数其活菌的数量，C错误；D、可根据透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物解磷能力大小，D错误。故选B。6.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的是（　　）①等培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在酒精灯旁的桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖⑥等待平板冷却 5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A.①②③④B.②③⑤C.④⑤⑥D.①②④⑥【答案】B【解析】【分析】倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染。【详解】①等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；②将灭过菌的培养皿放在酒精灯旁的桌面上，左手拔出棉塞，可防止杂菌污染，②正确；③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温可防止杂菌污染，③正确；④用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不能打开皿盖，④错误；⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；⑥等待平板冷却5～10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。故选B。【点睛】7.下图表示小明同学在实验室培养大肠杆菌过程中的部分操作，下列说法错误的是（　　）\nA.①②③步骤需要在酒精火焰旁操作B.培养基中必须含碳源、氮源、无机盐和水C.③步骤中从一次划线末端迅速开始下一次划线D.接种结束后，将④倒置后放入培养箱中培养【答案】C【解析】【分析】由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。【详解】A、由分析可知，①②③步骤依次表示倒平板、用接种环沾取菌液、进行平板划线，了防止被杂菌污染，操作时都需要在酒精灯火焰旁进行，A正确；B、不同的微生物对营养物质的需求存在差异，但水、碳源、氮源和无机盐是各种微生物所需的基本营养，所以培养基中必须含碳源、氮源、无机盐和水，B正确；C、每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的未端，从而通过多方向划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落，故③步骤中一次划线结束需要先灼烧接种环再开始下一次划线，C错误；D、④是培养，划线接种结束后，要将平板倒置后放入培养箱中培养，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染，D正确。故选C。8.下列有关土壤中分解尿素的细菌的分离，说法正确的是（　　）A.以尿素为唯一氮源的固体培养基平板上也可以分离出根瘤菌B.筛选分解尿素的细菌时，培养基中唯一的营养物质是尿素C.需对土样进行充分稀释再用稀释涂布平板法接种到培养基上D.脲酶需要经过内质网和高尔基体的加工后才具有生物学活性【答案】C【解析】【分析】培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基中的唯一氮源为尿素，只有能合成脲\n酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。【详解】A、以尿素为唯一氮源的固体培养基平板只能获得分解尿素的微生物，而根瘤菌是共生固氮菌，所以该培养基上不可以分离出根瘤菌，A错误；B、筛选分解尿素的细菌时，培养基中唯一的氮源是尿素，但培养基中还含有其他营养物质，如水和无机盐，B错误；C、稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面，故需对土样进行充分稀释再用稀释涂布平板法接种到培养基上，进行培养，C正确；D、分解尿素细菌属于原核生物，无内质网、高尔基体，D错误。故选C。9.我国是名副其实的发酵大国，发酵工程在食品工业、医院工业及农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列相关叙述错误的是（　　）A.利用极端条件下的微生物如嗜热菌、嗜盐菌生产洗涤剂B.利用黑曲霉发酵制得柠檬酸作为食品酸度调节剂使用C.将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵可生产乙型肝炎疫苗D.利用发酵工程生产的微生物农药，作为化学防治的重要手段，可用于防治病虫害【答案】D【解析】【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。【详解】A、极端微生物能在各种极端恶劣的环境中正常生活，利用极端条件下的微生物如嗜热菌、嗜盐菌可以生产洗涤剂，A正确；B、生产食品酸度调节剂，如柠檬酸可以通过黑曲霉的发酵制得，B正确；C、可以通过基因工程，将乙肝病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵工程制备乙肝疫苗，C正确；D、微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的，微生物农药作为生物防治的重要手段，将在农业的可持续发展方面发挥越来越重要的作用，D错误。故选D。10.发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产\n品。常用好氧菌谷氨酸棒状杆菌利用图1的发酵罐来大量生产味精，发酵流程如图2所示。下列叙述正确的是（　　）A.发酵中所使用的谷氨酸棒状杆菌菌种可从自然界筛选也可通过杂交育种获得B.为了保证发酵产品的产量和品质，图中发酵配料及发酵罐需经过严格的灭菌C.在发酵过程中，通过加料口取样，随时监测产物浓度和微生物数量D.发酵过程中需通入无菌空气，并通过搅拌使培养液与菌种充分接触后关闭通气口【答案】B【解析】【分析】发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。【详解】A、谷氨酸棒状杆菌属于原核生物，其繁殖方式是无性生殖，不能进行有性生殖，无法通过杂交育种获得，A错误；B、无菌技术是微生物发酵成功的关键，为了保证发酵产品的产量和品质，图中发酵配料及发酵罐需经过严格的灭菌，防止杂菌污染，B正确；C、在发酵过程中，应通过放料口取样，随时监测产物浓度和微生物数量，不能通过加料口取样，可能会导致杂菌污染，C错误；D、谷氨酸棒状杆菌属于好氧菌，在发酵过程中要不断地通入无菌空气，不能关闭通气口，D错误。故选B。11.植物组织培养是依据细胞的全能性，在体外将植物组织细胞培养成一个完整植株的过程。如图所示，下列相关叙述错误的是（　　）\nA.甲和丙分别是脱分化和再分化B.乙是愈伤组织，是离体的植物组织经过细胞增殖与分化形成的C.离体的植物细胞之所以能培养成完整植株，是因为植物细胞具有全能性D.丙过程的实质是基因的选择性表达【答案】B【解析】【分析】植物组织培养技术：过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）。原理：植物细胞的全能性。条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。题图分析，图中甲为脱分化过程，乙为愈伤组织，丙为再分化过程。【详解】A、植物组织培养的过程包括脱分化和再分化，分别是图中的甲和丙，A正确；B、乙是愈伤组织，外植体经过脱分化过程形成愈伤组织，脱分化过程只进行细胞增殖不进行细胞分化，B错误；C、植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，故离体的植物细胞之所以能培养成完整植株，是因为植物细胞具有全能性，C正确；D、丙过程为愈伤组织的再分化，该过程的实质是基因的选择性表达，D正确。故选B。12.科学家将天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合，培育出的驱蚊香草能散发出特殊气味，从而达到驱蚊的效果。下列关于驱蚊香草培育的叙述，错误的（　　）A.驱蚊香草的培育属于细胞工程育种，关键环节之一是原生质体间的融合B.驱蚊香草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、聚乙二醇等试剂或电融合法等方法C.驱蚊香草培育过程有愈伤组织和试管苗的形成，只利用了植物组织培养技术D.驱蚊香草不能通过天竺葵和香茅草有性杂交获得是因为不同物种间存在生殖隔离【答案】C【解析】【分析】根据题干信息分析，驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融\n合培育而成的，利用的是植物体细胞杂交技术，该技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，该技术最大的优点是克服远缘杂交不亲和障碍。【详解】A、驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的，采用了植物体细胞杂交技术，属于细胞工程育种，关键环节之一是原生质体间的融合，A正确；B、驱蚊草的培育过程中首先要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁获得原生质体，诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法（用聚乙二醇即PEG等试剂）或物理法（离心法、电融合法等），B正确；C、驱蚊香草培育过程采用了植物体细胞杂交技术和植物组织培养技术，C错误；D、不同物种间存在生殖隔离，故驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得，D正确。故选C。13.用组织培养技术繁殖一种名贵花卉的过程中，下列叙述不正确的是（）A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又減少消毒剂对细胞的伤害B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞C.用花粉离体培养可获得单倍体植株，说明花粉细胞仍具有全能性D.诱导愈伤组织生根时，培养基内通常应含生长素类调节剂【答案】B【解析】【详解】外植体消毒既要杀死材料表面的微生物，消毒剂还不能对细胞有伤害，A正确。在愈伤组织培养中进入细胞融合的诱导剂，因为愈伤组织有细胞壁，细胞不能融合，所以无法得到染色体加倍的细胞，B错误。用花粉离体培养可以得到单倍体植株，说明花粉细胞具有全能性，C正确。诱导愈伤组织生根时，培养基中生长素类应高于细胞分裂素类含量，D正确。点睛：植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例都会影响细胞的发育方向。如生长素用量比细胞分裂素用量比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。14.对皮肤烧伤进行治疗时，可选取烧伤患者的自身细胞，经体外培养获得自体健康皮肤，再通过皮肤移植术对患者进行治疗。下列说法错误的是（　　）A.进行原代培养前，选取的组织需经胰蛋白酶等处理成单个细胞后制成细胞悬液B.在体外培养细胞时，需要对培养液和用具进行灭菌处理，并且定期更换培养液C.细胞培养于含有95%的O2和5%的CO2的混合气体中，以维持培养液的pH\nD.进行传代培养时，悬浮培养的细胞可直接用离心法收集后分瓶培养【答案】C【解析】【分析】动物细胞的培养条件：（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒--定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。（2）营养：成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）。（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2是细胞代谢所必需的；CO2主要作用是维持培养液的pH。【详解】A、进行原代培养前，选取的组织需经胰蛋白酶等处理成单个细胞后制成细胞悬液，A正确；B、在体外培养细胞时，需要对培养液和用具进行灭菌处理，防止杂菌污染，并且定期更换培养液，补充营养物质，B正确；C、动物细胞培养所需的气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH，因此细胞培养过程需要提供含有95%空气和5%CO2的混合气体，以维持培养液的pH，C错误；D、进行传代培养时，悬浮培养的细胞可直接用离心法收集后制成细胞悬液，然后分瓶培养，D正确。故选C。15.下列对动物细胞核移植技术的描述中，错误的是（　　）A.胚胎细胞核移植技术难度要明显高于体细胞核移植技术B.核移植的过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的核C.核移植过程中通常采用MⅡ的卵母细胞作为受体细胞D.核移植技术培育的克隆动物并不是对供核动物进行100%的复制【答案】A【解析】【分析】动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到\n的动物称为克隆动物。【详解】A、哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物体细胞核移植的难度也就明显高于胚胎细胞核移植，且胚胎细胞核移植成功率更高，A错误；B、核移植的过程中可通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，同时也可一起吸出第一极体，B正确；C、体细胞核移植中，作为受体细胞的卵母细胞要在体外培养到MⅡ的中期，且卵母细胞中含有使全能性表达的物质，C正确；D、通过体细胞核移植方法生产的重组细胞中，其核遗传物质来自于供体细胞核，细胞质遗传物质来自于受体细胞的细胞质，所以不是对供核动物进行了100%的复制，D正确。故选A。16.双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。下图是科学家设计的生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体的部分过程。相关叙述不正确的是（　　）A.单克隆抗体的制备需要用到动物细胞融合和动物细胞培养技术B.该过程仅需两次筛选，即可筛选出单克隆杂交—杂交瘤细胞C.过程⑤的目的与过程①的目的都是获得相应的B淋巴细胞D.通过该技术合成的双特异性单克隆抗体的灵敏度更高【答案】B【解析】【分析】单克隆抗体的制备过程的细节：（1）二次筛选：①\n筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。（2）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。（4）提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。【详解】A、制备单克隆抗体过程中需用到动物细胞融合（骨髓瘤细胞和B淋巴细胞）和动物细胞培养技术，A正确；B、在单克隆抗体的制备过程中需两类筛选，第一类筛选③是选出出杂交瘤细胞，第二类筛选⑥是选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞群，其中⑥需要多次进行筛选，故该过程中的筛选次数＞2次，B错误；C、过程⑤的与过程①均是对小鼠注射特定抗原，目的都是获得相应的B淋巴细胞，C正确；D、该双特异性单克隆抗体能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物），故通过该技术合成的双特异性单克隆抗体的灵敏度更高，D正确。故选B。17.物理学家霍金曾经患有肌肉萎缩性侧索硬化症即“渐冻症”。有研究表明该病是由于突变的基因导致神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动；也有最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（IPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是（）A.诱导多功能干细胞分化的实质是基因的选择性表达，使细胞种类增多B.诱导多功能干细胞分化成的多种细胞中核酸相同，蛋白质却不完全相同C.用正常基因将控制合成毒蛋白基因替换，可以起到良好治疗作用D.植入神经干细胞，使受损的运动功能得到恢复，可以一定程度改善“渐冻症”【答案】B【解析】【分析】1、核酸包括DNA和RNA，DNA基本组成单位是脱氧核苷酸，RNA的基本组成单位是核糖核苷酸。2、在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，叫细胞分化。【详解】A、细胞分化的实质是基因的选择性表达，这会导致细胞种类的增多，A正确；B、核酸分为两种，DNA和RNA，诱导多功能干细胞分化成的多种细胞中DNA相同，mRNA和蛋白质不完全相同，B错误；C、由题意“该病是由于突变的基因导致神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物\n质的流动”可知，用正常基因将控制合成毒蛋白的基因替换，可能起到良好治疗作用，C正确；D、由题意“利用诱导多功能干细胞（IPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命”可知，植入神经干细胞，使受损的运动功能得到恢复，可以在一定程度改善“渐冻症”，D正确。故选B。18.小鼠克隆胚胎着床后胎盘发育显著异常可能是与克隆胚胎中H3K27me3印记基因过度表达有关，H3K27me3印记基因敲除极大提高了体细胞克隆的成功率，H3K27me3印记基因敲除的实验组克隆小鼠的体重与受精卵来源的小鼠一致，而对照组克隆小鼠的体重显著髙于受精卵来源的小鼠：实验组克隆小鼠的胎盘直径和重量也显著低于对照组克隆小鼠，而与受精卵来源的小鼠一致。下列相关分析错误的是（）A.克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因B.克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大C.H3K27me3印记基因过度表达抑制胎盘的发育D.H3K27me3印记基因的表达产物可能影响早期胚胎滋养层细细胞发育【答案】C【解析】【分析】1、生物体通过无性繁殖所生成的群体或个体称为克隆，由动物体内一个细胞经过无性生殖过程进而发育形成的动物个体为克隆动物。体细胞克隆即取出一个双倍体细胞核移入一个去核的卵细胞，并在一定条件下进行核卵重组，再植入代孕母体中发育成新个体的过程。供体细胞均来自高度分化的体细胞，其种类繁多、数量无限。2、H3K27me3印记基因敲除极大提高了克隆的成功率，H3K27me3印记基因敲除的实验组克隆小鼠的体重与受精卵来源的小鼠一致，显著低于对照组克隆小鼠的体重，说明克隆胚胎过大可能降低克隆胚胎着床后成活率。【详解】A、通过分析可知，克隆小鼠的体重显著高于受精卵来源的小鼠，故克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因，A正确；B、实验组克隆小鼠的胎盘直径和重量显著低于对照组克隆小鼠，而与受精卵来源的小鼠一致，说明克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大，B正确；C、H3K27me3印记基因敲除的实验组，克隆小鼠的胎盘直径和重量显著低于对照组克隆小鼠，而与受精卵来源的小鼠一致，说明HBK27me3印记基因可促进胎盘的发育，C错误；D、H3K27me3印记基因可影响胎盘的发育，而胎盘是由滋养层细胞发育而来的，故其表达产\n物可能影响早期胚胎滋养层细胞的发育，D正确。故选C。19.印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物，通过胚胎工程技术，可以让家猫代孕而繁育，主要步骤如下图所示。下列相关叙述错误的是（　　）A.为避免代孕猫对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂B.为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对雌性印度沙漠猫进行处理C.采集到的卵母细胞和精子，要经过成熟培养和获能处理后才能受精D.如需对早期胚胎进行胚胎分割处理，应选择桑椹胚或囊胚【答案】A【解析】【分析】1、胚胎移植的生理基础：（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。2、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚；对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。【详解】A、代孕猫一般不会对植入胚胎产生排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，A错误；B、用促性腺激素对雌性印度沙漠猫进行处理，可促其超数排卵，获得更多的卵母细胞，B正确；C、步骤甲为体外受精，体外受精时对精子要进行获能处理，卵母细胞也需要培养至减Ⅱ中期才能进行受精作用，C正确；D、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，还要注意将内细胞团均等分割，D正确。故选A。20.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①②③分别表示其对应的结果，请据图判断下面说法正确的是（　　）\nA.若a是胚胎分割技术，则①中个体的表现型完全相同B.若b是体外受精技术，则形成②的过程属于克隆C.若c是核移植技术，则形成③的过程体现了动物体细胞具有全能性D.胚胎移植过程中，需要对代孕母畜和供体母畜做同期发情处理【答案】D【解析】【分析】1、动物细胞核移植技术表面动物细胞核具有全能性。2、体外受精包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外受精，该技术产生的动物称为试管动物，属于有性生殖。3、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。4、表现型=基因型+外界环境。【详解】A、表现型=基因型+外界环境，故同一个胚胎分割形成的后代即使具有相同的遗传物质，但表现型不一定相同，A错误；B、若b是体外受精技术，则②为试管动物，形成②的过程属于有性生殖，不属于克隆，B错误；C、若c是体细胞核移植技术，则③反映了动物体细胞的细胞核具有全能性，没有体现动物体细胞具有全能性，C错误；D、①②③胚胎移植生产过程中的代孕母畜必须与供体母畜同期发情，保证胚胎植入相同的生理环境，D正确。故选D。21.将某病毒的外壳蛋白（L1）基因与绿色荧光蛋白（GFP）基因连接，构建L1-GFP融合基因，再将融合基因与质粒连接构建下图所示的表达载体。图中限制酶E1～E4处理产生的黏性末端均不相同。下列叙述错误的是（　　）\nA.构建L1-GFP融合基因需要用到的限制酶有E1、E2、E4B.E1、E4双酶切可确保L1-GFP融合基因与载体的正确连接C.GFP可用于检测受体细胞中目的基因是否表达D.启动子和终止子是DNA聚合酶识别和结合部位【答案】D【解析】【分析】限制酶的选择依据：（1）根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类：①应选择位于目的基因两端的限制酶；②不能选择目的基因内部的限制酶。（2）根据质粒的特点确定限制酶的种类：①通常选择与切割目的基因相同的限制酶，以确保出现相同的黏性末端；②在只有一种标记基因时，选择的限制酶不能破坏标记基因。【详解】A、构建L1-GFP融合基因需要先用内切酶处理获得L1基因和GFP基因，并将二者连接，故需要用到E1、E2、E4三种酶，A正确；B、图中限制酶E1—E4处理产生的黏性末端均不相同，E1、E4双酶切可以有效减少载体自身连接和融合基因自身连接，保证L1-GFP融合基因与载体准确连接，B正确；C、绿色荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达，C正确；D、启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能启动转录过程，终止子也不是DNA聚合酶识别和结合的部位，其具有终止转录过程的作用，D错误。故选D。22.动物生物反应器和研究开发重点是动物乳腺反应器，可把人体相关基因导入到哺乳动物的卵细胞中，使生出的转基因动物长大后产生的乳汁中含有人类所需要的不同蛋白质。培育作为“生物反应器”的动物涉及的现代生物技术有（　　）①基因工程　   ②体外受精　   ③胚胎移植　   ④早期胚胎培养A.①②③④B.②③④\nC.①③④D.②③【答案】A【解析】【分析】培育作为“动物生物反应器”的动物需要的技术流程为，首先将所需要的不同蛋白质的相关基因通过基因工程技术导入到哺乳动物的卵细胞中，形成受精卵，该受精卵可通过体外受精获得，而后将转基因成功的受精卵经早期胚胎培养和胚胎移植，培育出能生产所需要的不同蛋白质的动物，该动物称为生物反应器。【详解】①依题意可知：利用“动物生物反应器”获得人类所需要的不同蛋白质，需要根据人们的意愿定向改造生物的性状，因而需要用到基因工程技术，①正确；②在基因工程技术中，获得的重组DNA需要用显微注射技术导入到哺乳动物的卵细胞中，再形成受精卵，而受精卵的获得离不开体外受精，②正确；③当胚胎发育到一定阶段，需进行胚胎移植才能获得具有“动物生物反应器”的动物，③正确。④含有目的基因的受精卵，需用动物细胞培养技术（或早期胚胎培养技术）进行培养，使之发育为早期胚胎，④正确。综上分析，A符合题意。故选A。23.在基因工程操作中，科研人员利用识别两种不同序列的限制酶（R1和R2）处理基因载体，进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，结果如图所示。以下相关叙述中，不正确的是（）A.该载体最可能为环形DNA分子B.两种限制酶在载体上各有一个酶切位点C.限制酶R1与R2的切割位点最短相距200bpD.限制酶作用与该载体会导致氢键和肽键断裂\n【答案】D【解析】【分析】限制酶可识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定的核苷酸之间切开磷酸二酯键，产生具有黏性末端或平末端的DNA片段。据图可知，当仅用一种限制酶切割载体时，仅产生一种长度的DNA片段，两种限制酶同时切割时产生两种长度的DNA片段。【详解】A、由题可知，当仅用一种限制酶切割载体时，仅产生一种长度的DNA片段，因此该载体最有可能为环状DNA分子，A正确；B、由题可知，当仅用一种限制酶切割载体时，两种限制酶切割产生的DNA片段等长，而两种限制酶同时切割时则产生两种长度的DNA片段，所以两种限制酶在载体上各有一个酶切位点，B正确；C、由题可知，两种限制酶同时切割时则产生600bp和200bp两种长度的DNA片段，所以两种限制酶的酶切位点至少相距200bp，C正确；D、限制酶切割DNA分子，破坏的是作用位点上两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键，D错误。故选D。24.关于基因工程，下列说法正确的有（　　）①一种限制酶只能识别一种核苷酸序列②基因工程是在DNA分子水平上进行的设计和施工③限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列④只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达⑤基因工程可以将一种生物的优良性状移植到另一种生物身上⑥质粒是基因工程中唯一用作运载目的基因的载体A.2项B.3项C.4项D.5项【答案】B【解析】【分析】1、基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。2、限制酶能够识别双链DNA\n分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。【详解】①酶具有专一性，故一种限制酶只能识别一种核苷酸序列，①正确；②基因工程是在DNA分子水平上进行的设计和施工，②正确；③不同限制酶的切口一般是不同的碱基序列，③错误；④目的基因进入受体细胞不一定能成功实现表达，④错误；⑤基因工程可以将一种生物的优良性状移植到另一种生物身上，⑤正确；⑥质粒是基因工程中常用作运载目的基因的载体，但不是唯一的载体，⑥错误。故选B。25.缺乏维生素a就容易导致出现夜盲症，营养不良，甚至有一些能够威胁到生命。而β-胡萝卜素可以在人体内转化成维生素a。科学家尝试通过转基因技术生产富含胡萝卜素的大米。八氢番茄红素合酶（其基因用psy表示）和胡萝卜素脱饱和酶（其基因用crtl表示）参与β-胡萝卜素的合成。根据以上信息分析正确的是A.重组质粒中的目的基因含有psy基因和crtl基因B.构建重组质粒需要限制酶、DNA连接酶和核酸酶C.可通过显微注射法将目的基因导入水稻受体细胞D.PCR既可扩增特定基因也可检测目的基因表达【答案】A【解析】【分析】基因工程需要用到的工具有限制酶、DNA连接酶和运载体。【详解】A、根据“八氢番茄红素合酶和胡萝卜素脱饱和酶参与β-胡萝卜素的合成”可知，重组质粒中的目的基因含有psy基因和crtl基因，A正确；B、构建重组质粒需要限制酶、DNA连接酶，不需要核酸酶，B错误；C、可通过农杆菌转化法将目的基因导入水稻受体细胞，C错误；D、PCR既可扩增特定基因，但要检测目的基因是否表达应该用抗原-抗体杂交法，D错误。故选A。26.限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示．下列有关说法错误的是（　　）\nA.a酶与b酶切断的化学键相同B.能被b酶识别并切割的序列也能被a切割C.在相同的DNA分子中a酶的识别位点一般明显要比b酶多D.将大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新连接后的DNA片段不一定全都能被a切割【答案】D【解析】【分析】分析题图：限制酶a和限制酶b的识别序列不同，但两者切割产生的黏性末端相同，因此经过两种酶切后的黏性末端可在DNA连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。【详解】A、a酶与b酶切断的化学键相同，都是磷酸二酯键，A正确；B、据图分析，酶a的识别序列是-GATC-，酶b识别序列是-GGATCC-，酶b的识别序列包含酶a的序列，故能被b酶识别并切割的序列也能被a切割，B正确；C、a酶的识别序列比b酶短，识别序列越短，含有的识别位点就越多，因此在相同的DNA分子中b酶的识别位点明显少于a酶，C正确；D、将大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新连接后的DNA片段全都能被a切割，但只有部分能被b酶切割，D错误。故选D。27.限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，以下说法正确的是(　　)A.DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键B.限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸C.E·coliDNA连接酶既能连接黏性末端，也能连接平末端D.限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA【答案】B【解析】【分析】基因工程最基本的工具：①基因的“剪刀”---限制性核酸内切酶（简称限制酶）②基因的“针线”---DNA连接酶③基因的运载体---质粒、噬菌体、动植物病毒等。【详解】DNA连接酶连接的是两个DNA片段，故A错误；限制酶只能切割DNA分子，烟草花叶病毒的核酸是RNA，不能切割，故B正确；E·coliDNA\n连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末端，故C错误；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是不会剪切自身的DNA，故D错误。【点睛】解决本题需要明确两点：一是限制酶只能在特定的位点上切割DNA分子；二是限制酶存在于原核生物，主要作用是切割外源DNA，而使之失效，达到保护自身的目的。28.下列关于蛋白质工程的说法，错误的是（　　）A.蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要B.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作C.蛋白质工程能产生自然界中不曾存在的新型蛋白质分子D.蛋白质工程需要从预期的蛋白质功能出发，从而设计出相应的基因【答案】B【解析】【分析】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。【详解】A、蛋白质工程能按照人们的意愿定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要，A正确；B、基因的结构决定蛋白质的结构，因此，要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造基因来完成，而不是直接对蛋白质分子进行操作，B错误；C、蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子，C正确；D、蛋白质工程的流程为：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因），即蛋白质工程需要从预期的蛋白质功能出发，从而设计出相应的基因，D正确。故选B。29.如图是PCR扩增的过程示意图，其中叙述正确的是（）A.A过程不需要解旋酶参与B.TaqDNA聚合酶是在B过程发挥作用的\nC.该过程需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的D.PCR反应体系只需要加入模板DNA、TaqDNA聚合酶和四种脱氧核苷酸【答案】A【解析】【分析】1、PCR技术：（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。（2）原理：DNA复制。（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物。（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。2、分析题图：A是高温变性过程，B为低温复性过程，C为中温延伸过程。【详解】A、A为高温变性过程，该过程中高温会破坏DNA双链间的氢键，进而达到解旋的目的，因此不需要解旋酶的参与，A正确；B、TaqDNA聚合酶是在C中温延伸过程发挥作用的，B错误；C、该过程需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是不互补的，否则会形成引物二聚体，进而影响目的基因的扩增，C错误；D、PCR反应体系需要加入模板DNA、TaqDNA聚合酶、四种脱氧核苷酸和两种引物，D错误。故选A。30.植物基因工程可以改造农作物性状，使农作物变得更加高产。如图是培育良种水稻的有关原理和步骤，有关叙述错误的是（　　）A.图中表达载体中的T-DNA插入外源基因后将失去作用B.图中②过程需要在无菌环境下用Ca2+处理土壤农杆菌C.需要用除草剂检测转基因植株是否具有抗除草剂性状\nD.相关抗性基因可以整合到植物细胞的染色体DNA上【答案】A【解析】【分析】据图分析，图中①代表构建基因表达载体，②代表将含有目的基因的Ti质粒转入农杆菌，③代表用农杆菌侵染植物愈伤组织细胞，④代表再分化，⑤代表植物生长发育为植株的过程。【详解】A、T-DNA可将T-DNA之间的DNA序列转移并整合至受体细胞的染色体DNA上，使目的基因能够稳定遗传，故T-DNA插入外源基因后不会失去作用，A错误；B、用Ca2+处理农杆菌，使农杆菌处于感受态，利于农杆菌吸收目的基因完成转化过程，故图中②将载体导入农杆菌过程需要在无菌环境下用Ca2+处理土壤农杆菌，B正确；C、为从个体水平上检测图中植株是否具有抗除草剂性状，可采用的方法是用相应除草剂喷洒待测植株，C正确；D、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA具有可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上的特点，故相关抗性基因可以整合到植物细胞的染色体DNA上，D正确。故选A。二、非选择题31.孔雀石绿（简称MG）是广泛使用的有机染料，在自然环境中极难降解，容易引起土壤污染，进而危害人体健康。因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明。（1）MG降解菌富集培养时，制备的培养基应该能为其生长提供4类营养物质，即___________________。（2）图中所示的分离纯化细菌的方法是_________________。对土壤中的MG降解菌进行计数时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_____________________。实验中初步估测A培养瓶中细菌细胞数为1.5×109个/mL，若要在图中每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且每个平板上长出的菌落数约为150个，则应将A中的菌液稀释_______倍。\n（3）MG高效降解菌株的鉴定：将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基（其他营养成分等适宜）上，根据培养基是否出现_____________，就可以鉴别出目的菌株。【答案】（1）水、碳源、氮源和无机盐（2）①.稀释涂布平板法②.菌液浓度过高③.106（3）透明圈【解析】【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【小问1详解】培养基为微生物提供水、碳源、氮源和无机盐4类营养物质。【小问2详解】图中所示的分离纯化细菌的方法是稀释涂布平板法，对土壤中的MG降解菌进行计数时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能是菌液浓度过高，未形成单菌株。设A中的菌液稀释X倍，则150÷0.1×X=1.5×109个/mL，计算出X=106。【小问3详解】MG高效降解菌株的鉴定：由题干信息可知，MG在水中溶解度低，含过量MG的固体培养基不透明，若目的菌株能够降解MG，则会在培养基上出现以菌株为中心的透明圈。【点睛】本题考查微生物的分离与培养，要求考生识记微生物实验中的灭菌、接种方法等知识，意在考查学生识记所学知识要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力，同时获取题图信息准确答题。32.如图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请回答下列问题：\n（1）要获得已免疫的小鼠B细胞，需要用__________对小鼠进行免疫。（2）经由到融合产生的A细胞可能有多种，需要经选择培养以获得杂交瘤细胞，然后再进行____________，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。（3）与单克隆抗体相比，常规血清抗体的缺点是_______________。（4）若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图Ⅱ中囊胚进行___________，操作过程需要特别注意的问题是须将囊胚的内细胞团进行_______________。【答案】（1）特定的抗原（2）克隆化培养和抗体检测（3）产量低、纯度低、特异性差（4）①.胚胎分割②.均等分割【解析】【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖；（2）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体；（3）两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；（4）两次抗体检测：专一抗体检验阳性；（5）提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取；（6）单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。2、胚胎分割：是指采用机械方法将早期胚胎切割2等份、4等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。【小问1详解】对小动物注射抗原，可从该动物的脾脏中获取效应B细胞，效应B细胞产生的抗体具有专一性，故要获得已免疫的小鼠B细胞，需要用特定的抗原对小鼠进行免疫。【小问2详解】在动物细胞融合过程中，直接产生的A细胞可能有3种，包括小鼠B细胞自身融合细胞、小\n鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞，经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测等筛选过程，最终才能获得产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。【小问3详解】单克隆抗体与一般的抗体相比，优点是特异性强，灵敏度高，可在体外大量生产，而常规血清抗体的缺点是产量低、纯度低、特异性差。【小问4详解】若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图Ⅱ中囊胚进行胚胎分割，操作过程需要注意将囊胚的内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。【点睛】本题考查单克隆抗体的制备、动物细胞培养、胚胎移植的相关知识，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。33.野生黑芥（染色体数为2A）具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜（染色体数为2B）易感染黑腐病菌而患病，用生物工程技术获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株，操作流程如图。请据图回答下列问题：（1）图中①涉及到的生物工程技术是__________________。此时培养液需要保持一定渗透压的目的是________________________________。（2）经过①操作后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体黑芥细胞的__________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。（3）用上述方法培养的该杂种植株含有的染色体数目是________________。用黑腐病菌感染杂种植株，筛选出具有______________能力的杂种植株。【答案】（1）①.植物体细胞杂交②.维持原生质体的正常形态（2）叶绿体（3）①.2A＋2B②.抗黑腐病【解析】【分析】分析题图：本题是植物体细胞杂交过程，①是诱导原生质体融合，②是再分化形成再生植株，培养液需要保持一定渗透压，保持原生质体原有的形态。该过程涉及原生质体的融合及植物组织培养。\n【小问1详解】图中涉及到的生物工程技术有植物体细胞杂交（原生质体融合与植物组织培养）。过程①PEG的作用是诱导原生质体融合，涉及到的生物工程技术是植物体细胞杂交。此时培养液需要保持一定渗透压的目的是维持原生质体的正常形态。【小问2详解】用于融合的两个细胞，一个是黑芥苗的叶肉细胞，一个是花椰菜的根部细胞，其中供体细胞特有的结构是叶绿体，因此可通过观察叶绿体的有无作为初步筛选杂种细胞的标志。【小问3详解】野生黑芥的染色体数为2A，花椰菜的染色体数为2B，因此用上述方法培养的该杂种植株，即黑芥—花椰菜，含有的染色体数目是2A＋2B。由题可知，实验的目的是获取抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株，故用黑腐病菌感染杂种植株，可筛选出具有抗黑腐病的杂种植株。【点睛】本题考查植物体细胞杂交技术和染色体变异，要求考生识记和理解植物体细胞杂交技术的过程和原理，考生的识记能力和理解能力是解答本题的关键。34.研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草，该过程所用的质粒与含抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性核酸内切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。请回答下列问题。（1）利用PCR技术扩增干扰素基因时，扩增第n次时，需要________个引物。（2）用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，应选用限制酶___________切割质粒，选用限制酶___________切割含目的基因的DNA片段。（3）将上述切开的质粒与目的基因混合，加入DNA连接酶连接后，导入受体细胞，受体细胞的类型（对两种抗生素表现出抗性R或敏感性S）可能包含_________（不考虑基因突变）。①XR、YR   ②XR、YS　③XS、YR　④XS、YS（4）转基因植物所携带的目的基因可能传递给非转基因植物，造成基因污染。如果将目的基\n因导入叶绿体DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是________________________。【答案】（1）2n（2）①.BamHⅠ②.Sau3AⅠ（或BamHⅠ、Sau3AⅠ）（3）①②④（4）叶绿体基因不会通过花粉传给下一代【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。4、目的基因的检测与鉴定。【小问1详解】利用PCR技术扩增干扰素基因时，扩增第1次时，需要2个引物；扩增第2次时，需要4个引物，所以扩增第n次时，需要2n个引物。【小问2详解】由于目的基因必须插入运载体的启动子与终止子之间，才能正常表达，所以不能用限制酶BclⅠ和HindⅢ进行切割，又因为BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ三种限制酶切割形成的粘性末端是相同的，所以应该用BamHⅠ切割质粒；目的基因两侧有限制性核酸内切酶BamHI和Sau3AⅠ的识别序列，故可用Sau3AⅠ或BamHⅠ、Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段。【小问3详解】由于将上述切开的质粒与目的基因混合，加入DNA连接酶连接后，可能产生三种结果：普通质粒、重组质粒、目的基因自身环化结构，因此导入受体受体细胞，导入普通质粒的将表现为①XR、YR；导入重组质粒的将表现为②XR、YS；导入目的基因环化结构的将表现为④XS、YS，故选①②④。【小问4详解】转基因植物所携带的目的基因可能会通过花粉传递给非转基因植物，造成基因污染。如果将目的基因导入叶绿体DNA中，叶绿体基因是细胞质基因，不会通过花粉传给下一代，就可以有效避免基因污染。